Caratterizzazioni Biochimiche e Molecolari

Questa comunicazione descrive la prima caratterizzazione generale biochimica, molecolare e funzionale del veleno dallo scorpione blu cubano Rhopalurus junceus, che è spesso usato come prodotto naturale per la terapia anti – cancro a Cuba. Il veleno solubile di questo aracnide non è tossico per i topi, iniettato per via intraperitoneale a dosi fino a 200 mg / 20 g di peso corporeo, ma è mortale per gli insetti a dosi di 10 mg per animale.

Il veleno provoca tipici effetti alfa e beta sui canali del Na+, quando testati utilizzando tecniche di patch-clampnelle cellule di neuroblastoma in vitro. Colpisce anche le correnti K+ condotte dai canali ERG (etere-a-go-go related gene).

È stato dimostrato che il veleno solubile mostra fosfolipasi, ialuronidasi e attività antimicrobiche. La cromatografia liquida ad alte prestazioni del veleno solubile può separare almeno 50 componenti. Quattro di tali peptidi sono stati isolati per omogeneità e sono state determinate le loro masse molecolari e la sequenza di ammino acidi N-terminali. Il componente principale (RjAa12f) è stato completamente sequenziato dalla degradazione di Edman. Contiene 64 residui di amminoacidi e quattro ponti disolfuro, simili ad altre tossine conosciute dello scorpione. Una libreria di cDNApreparata dalle ghiandole velenose di uno scorpione consentiva la clonazione di 18 geni che codificano per i peptidi del veleno, tra cui RjA12f e undici altri geni strettamente correlati. Le analisi di sequenza e la ricostruzione filogenetica delle sequenze di amminoacidi dedotte dai geni clonati hanno mostrato che questo scorpione contiene sequenze di tossine come canali del sodio chiaramente segregate in due gruppi monofiletici. Considerando il complesso insieme di effetti sulle correnti di Na+ verificati qui, questo veleno garantisce sicuramente ulteriori indagini.

Gli autori di questo articolo sono obbligati con il Prof. Misael Bodier Chivaz della Facultad de Ciencias Médicas de Guantanamo, Cuba e i loro collaboratori, per averci fornito il primo campione di veleno utilizzato per questo articolo. Questa pubblicazione è dedicata alla sua memoria. Il professor Bordier è morto prima che questo articolo fosse scritto e senza il suo consenso, non potevamo includere il suo nome come coautore, tuttavia il suo contributo a questa comunicazione era importante. Gli autori sono profondamente in debito con il dott. Ricardo Rodríguez de la Vega del laboratorio europeo di biologia molecolare di Heidelberg, in Germania, per condurre l’analisi filogenetica qui presentata. Gli autori desiderano anche ringraziare il Dr. Fernando Z. Zamudio per l’aiuto con il sequenziatore di amminoacidi e il Dr. Cesar Ferreira Batista dell’Unità di Proteomica dell’Istituto di biotecnologia per la determinazione della massa molecolare dei peptidi puri. Questo lavoro è stato parzialmente supportato da una borsa di studio dall’Instituto Bioclon S.A de C.V. (Messico) e Dirección General del Personal Académico dell’UNAM (DGAPA n. 204110 a LDP). Rodolfo RodríguezRavelo (abbreviato Rodríguez, R.R.) è un dottorato di ricerca. studente, destinatario della borsa di studio UNAM – Università di Habana, Cuba.

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